1983 දී දියුණු කරන ලද PCR ක්රියාවලිය DNA අනුක්රමය ක්රියාවට නැංවීම සහ තනි නියුක්ලියෝටයිඩවල අනුපිළිවෙල හඳුනා ගැනීමට හැකි විය.
මෙම ක්රමයේ තාපය හෝ තාපනය කිරීම සඳහා ප්රතික්රියාවේ තාපය හෝ නැවත නැවත උෂ්ණත්වය සහ සිසිලනය භාවිතා කරයි. PCR අඛන්ඩව ක්රියාත්මක වන පරිදි, "නව" DNA ආකෘතියට ආකෘතියක් ලෙස භාවිතා කරනු ලබන අතර දාම ප්රතික්රියාව සිදුවෙයි.
PCR ශිල්ප ක්රම ප්රෝටීන ඉංජිනේරු විද්යාව , ක්ලෝනකරණය, සායනික විද්යාව (DNA ඇඟිලි සලකුණු), පියරිටි පරීක්ෂාව, පාරම්පරික සහ / හෝ බෝවෙන රෝග පිළිබඳ රෝග නිර්ණය හා පාරිසරික සාම්පල විශ්ලේෂණය කිරීම සඳහා යොදා ගැනේ.
විශේෂයෙන් විශේෂයෙන් PCR විශේෂයෙන් ප්රයෝජනවත් වන්නේ, එය ඩීඑන්ඒ සාක්ෂි පවා කුඩාම ප්රමානය වැඩි කරන නිසාය. වසර දහස් ගණනක් පැරණි DNA DNA විශ්ලේෂණය කිරීමට PCR යොදා ගත හැකි අතර ලොව පුරා සිටින 800,000 ක් පමණ වයසැති දැවැන්ත මම්මෙකුගෙන් මෙවන් ක්රම හඳුනාගෙන තිබේ.
PCR පටිපාටිය පහත පරිදි වේ.
- ආරම්භනය: මෙම පියවර අවශ්ය වන්නේ ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් සඳහා පමණි. ප්රතික්රියාව 94 ත් 96 ත් අතර වන අතර උෂ්ණත්වය 1-9 විනාඩි පවත්වා ඇත.
- ක්රියාවලිය ආරම්භ කිරීම අවශ්ය නොවේ නම් denatureකරණය යනු පළමු පියවරයි. තත්පර 20-30 තත්පර 94-98 ° C ප්රතික්රියාව තාපාංකය වේ. DNA අණුව හයිඩ්රජන් බන්ධන කඩාකප්පල් වන අතර තනි පේළියේ DNA අණුවක් නිර්මාණය වී ඇත.
- උෂ්ණත්වය : ප්රතික්රියා උෂ්ණත්වය 50 ත් 65 ත් අතර අගයක් දක්වා අඩු වන අතර තත්පර 20-40 අතර කාලයක් පවත්වා ගත හැක. එක් පොල්ලකින් යුත් DNA ආකෘතියට මුල්ම උදාහරණ වේ. මෙම පියවරේදී උෂ්ණත්වය ඉතා වැදගත් වේ. එය උණුසුම් නම්, නූඩ්ල්ස් බැඳිය නොහැකි විය. එය ඉතා සීතල නම්, ප්රථිපලය අසම්පූර්ණ ලෙස බන්ධනය විය හැකිය. නූඩ්ල්ස් අනුපිළිවෙල අනුක්රමය අනුපිළිවෙළට අනුකූල වන විට හොඳ බන්ධනයක් ඇති වේ.
- දිගුව / උඩුගත කිරීම: මෙම පියවරේදී උෂ්ණත්වය අනුව පොලිමරේස් වර්ගය අනුව වෙනස් වේ. DNA පොලිමරේස් සම්පූර්ණයෙන්ම නව DNA කාණ්ඩයක් සංශ්ලේෂණය කරයි.
- අවසාන දිගු වීම: අවසාන පියවර PCR චක්රයේ 5-15 විනාඩි සඳහා මෙම පියවර ක්රියාත්මක වේ.
- අවසාන ස්ථානය: මෙම පියවර අත්යවශ්ය නොවේ. උෂ්ණත්වය සෙල්සියස් අංශක 4-15 ක මට්ටමක පවත්වා ගෙන යයි.
ක්රියාපටිපාටිය අදියර තුනකට බෙදා ඇත.
- විස්තීර්ණික විස්තාරණය: සෑම චක්රයක් තුළම, ප්රතිසංශෝධිත ඩීඑන්ඒ නිශ්චිත කෑල්ලක් දෙගුණයක් වේ.
- ලීනේ කිරීම: අද වන විට ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් ක්රියාකාරිත්වය හා ක්රියාකාරිත්වයන් නාස්ති වන බැවින් ප්රතික්රියාව මන්දගාමී වේ.
- සානුව: තවත් භාණ්ඩයක් එකතු නොවේ.