මෙම බෆරයේ ඩීඑන්ප්රොසෙරෝසිස් වෙන්වීම සඳහා යොදා ගනී
TBE බෆරයක් කුඩා DNA කොටස් (MW <1000) වෙන් කිරීම සඳහා බෙහෙවින් ප්රයෝජනවත් වේ.
TBE ට වැඩි බෆර්කිරීමේ ධාරිතාවයක් සහ TAE බෆරයට වඩා තියුණු විභේදනයක් ලබා දෙනු ඇත. TAE බෆරයක් යනු Tris පදනමක්, ඇසිටික් අම්ලය සහ EDTA (Tris-acetate-EDTA) වලින් සමන්විත විසඳුමක් වේ.
TBE සාමාන්යයෙන් TAE වලට වඩා මිල අධිකය. DNA DIGase වලක්වා ගනී. ඉන්පසු DNA DNA පිරිපහදු කිරීම හා ලිගිලි පියවර අනුගමනය කරයි. ඊලඟ සරල පියවර තුන සමඟ, TBE බෆරයක් හදන්න. මෙම බෆරය නිර්මාණය කිරීම සඳහා විනාඩි 30 කට වඩා ගත නොවිය යුතුය. මෙන්න මෙහෙමයි:
EDTA කොටස් තොගය සකස් කිරීම
EDTA (එතිලින්ඩැමිම් ටෙට්රා ඇසිටික් අම්ලය) විසඳුම කලින් සූදානම් කළ යුතුය. PH අගය 8.0 පමණ වන තෙක් EDTA සම්පූර්ණයෙන්ම විසුරුවා හරිනු නොලැබේ. මිලිලීටීටර 500 මිලිලීටර ද්රාවණය සඳහා 0.5 M EDTA සඳහා ඩීඩෝඩියම් ලවණ ග්රෑම් 93.05 ග්රෑම් කිරණ (FW = 372.2) කිරා මැන බලන්න. ඉන්පසු එය මිලි ලීටර් 400 ක් තුළ දියෝඩියෙන් ඔක්ටේන් ඔක්සයිඩ් හා pH අගය සූදානමි. ඊට පස්සේ, මිලි ලීටර් 500 ක අවසාන පරිමාවකට විසඳුමක් ගන්න.
TBE කොටස් තොගය සකස් කිරීම
54 g ග්රෑම් ටි්රස් පාදයක් (FW = 121.14) සහ 27.5 ග්රෑම් බෙරීක් අම්ලය (FW = 61.83) බරැති TBE සාන්ද්රිත (5x) කොටස් විසඳුමක් සාදන්න. ඉන්පසු 0.5 M EDTA (pH 8.0) මිලි ලීටර් 20 ක් එකතු කරන්න.
මෙම ද්රාවණය කාමර උෂ්ණත්වයේ ගබඩා කර ඇති නමුත් පැරණි විසඳුම් තුළ ඇති අවපාතයක් ඇත. වීදුරු බෝතල් තුළ බෆරයක් ගබඩා කර තබන්න.
TBE හි ක්රියාකාරී විසඳුමක් සකස් කිරීම
ඇග්රරස් ජෙල් ඉලෙක්ට්රෝෙටෝෙපෝෙසස් සඳහා TBE බෆරයක් 0.5x (සාන්ද්රිත ෙකොටස 1:10) සාන්ද්රණය භාවිතා කළ හැකිය. ප්රෝටීන විසඳුම Deion ජලය තුළ 10x මගින් දිරිමත් කිරීම. අවසන් ද්රාවණ සාන්ද්රණය: mM Tris-borate සහ 1 mM EDTA වේ. බෆර දැන් ඇග්රරස් ජෙල් ක්රියාත්මක කිරීම සඳහා සූදානම් වේ.
ඔබට අවශ්ය කුමක්ද?
TBE බෆරයක් සාදා ගැනීම සඳහා, ඔබට අවශ්ය වන්නේ ද්රව්ය හතරක් පමණි. මෙම ලැයිස්තුවේ ඉතිරි අයිතම වන්නේ උපකරණ. EDTA ඩීඩේඩියම් ලවණ, Tris පදනම, බෝරික් අම්ලය හා ඩයිනොයිඩ් ජලය අවශ්ය වන ද්රව්ය හතරයි.
උපකරණ සඳහා, ඔබට සුදුසු පරිදි pH අගය සහ කමාංකන ප්රමිති අවශ්ය වේ. ඊට අමතරව, ඔබට මිලිලීටර 600 ක් සහ 1500 මිලිලීටර් මුහුම් හෝ බඳුනක් අවශ්ය වේ. ඔබේ උපකරණ අවශ්යතා සවි කිරීම සිලින්ඩර හා බාර් හා පොහොර තැලීම.
ඔබ ආරම්භ කිරීමට පෙර ඔබට අවශ්ය සියලු දේ ඇති බවට වග බලා ගන්න ඔබ භාවිතා කරන රසායනාගාරයේ බඩු තොග පරීක්ෂා කරන්න. නිසි ද්රව්ය වලින් ඉවත්ව ඇති නිසා විසඳුමක් පිළියෙල කිරීම මැද නතර කිරීමට වඩා නරක දෙයක් නැත.
ඔබේ විද්යාගාරය පාසැලේ හෝ ඔබේ වැඩ බිමෙහි නම්, එහි ඇති සියලුම අයිතමයන් ඇති බව දැකීමට නිසි අය සමග පරීක්ෂා කරන්න. එසේ කිරීමෙන් ඔබේ කාලය හා ශක්තිය ඉතිරි වේ.