ප්රෝටීන් ඉංජිනේරු සඳහා මෙවලම්

01 පොලිමරේස් දාම ප්රතික්රියාව

සීමා කිරීම එන්සයිම

ප්රෝටීන් එන්ඩොනියුමාලස් ලෙස හඳුන්වන එන්සයිම සොයා ප්රෝටීන ඉංජිනේරු විද්යාව සඳහා අත්යවශ්ය වේ. මෙම එන්සයිම නියුක්ලියෝටයිඩ් අනුක්රමය මත පදනම්ව නිශ්චිත ස්ථානවලදී ඩීඑන්එන් විසුරුවා හැරේ. විවිධ ස්ථානවල ඩීඑන්ඒ කැපීම සඳහා විවිධාකාර සීමාකිරීම් එන්සයිම සිය ගණනක් බැක්ටීරියා වර්ග බොහොමයක හුදකලා වී ඇත. සීමාසහිත එන්සයිමයෙන් DNA කපා ඇති විවිධ ප්රමාණවලින් කුඩා කැබලි වර්ග නිෂ්පාදනය කරයි. ජෙල් ඉලෙක්ට්රෝෙටෝෙපෝෙසස ෙහෝ වර්ණාලෙගෝචනය අනුව ඒවා ෙවන් කළ හැක.

විද්යුත්ෙපේසරණ 03

සෛල සංස්කෘතියකින් ඩීඑන්ඒ පිරිසිදු කිරීම හෝ සීමිත එන්සයිම භාවිතා කර එය කපා දැමීම අපට ඩීඑන්ඒ දෘශ්ය කිරීමට නොහැකි නම් - එනම්, ඔබේ සාරය කිසිවක් අඩංගුද නැද්ද යන්න හෝ සොයාගත නොහැකි මාර්ගයක් හෝ ඔබ නොදන්නා ආකාරයට ඒක කපන්න. මෙය කිරීමට එක් ක්රමයක් නම් ජෙල විද ත්පෝෂාරීකරණයයි. ජාන විවිධාකාර අරමුණු සඳහා යොදා ගනී. DNA ආලේප සහ කුඩයක් සොයාගැනීම සඳහා කැපූ DNA දස දෙස.

04 DNA කොටස් දෙකකට සම්බන්ධ වන්න

ජාන විද්යාත්මක පර්යේෂණවලදී, බොහෝ විට DNA අණුවක හෝ ඊට වැඩි ගණනක් සම්බන්ධ කිරීම සඳහා ප්රතික්රියාකාරකයක් සෑදීමට හෝ සීමිත එන්සයිම සමඟ කපා ඇති චක්රලේඛය වසා දැමීම අවශ්ය වේ. නියුක්ලියෝටයිඩ් දම් අතර සංයුජ බන්ධන නිර්මාණය කළ හැකි එන්සයිම ලෙස හැඳින්වේ. මෙම ක්රියාවලියෙහි එන්සයිම DNA පොලිමරේස් I සහ පොලිනුකේටයිඩයික් කයිනසේස් ද වැදගත් වේ. ඒවා පිළිවෙළින් හෝ '5' අවසානයේ ෆොස්ෆොරයිලීකරණය කිරීම සඳහා වැදගත් වේ.

05 කුඩා ස්වයං අනුරූපී DNA අණුවක් තෝරා ගැනීම

බැක්ටීරියා ගණිතමය වල කොටසක් නොවන කුඩා DNA චක්රය සහිත කොටස්, නමුත් ස්වයං-අනුරූපනය කිරීමේ හැකියාව ප්ලාස්මිඩ් ලෙස හැඳින්වේ. ක්ෂුද්ර ජීවීන් අතර ජාන ප්රවාහනය සඳහා ප්ලාස්මිඩ් බොහෝ විට වාහකයන් ලෙස භාවිතා වේ . ජෛව තාක්ෂණ විද්යාවේදී, උන ජානය වැඩි වී ඇති අතර ජාන සහ ප්ලාස්මිඩ යන දෙකෙහි සීමා කිරීම් එන්සයිම ද කපා ඇත. ඒවා නැවත සංකීර්ණ DNA අණුවක් ලෙස හැඳින්වේ. වෛරස (බැක්ටීරියාජී) ඩීඑන්ඒ ද විෂබීජ ලෙස භාවිතා කළ හැක, කොස්මිමීස්, බැක්ටීරියාභෝග ජාන අඩංගු ප්රතික්රියාකාරී ප්ලාස්මිඩ් ද විය හැකිය.

06 ධාරක සෛලයකට අච්චුවකට චලනය කිරීමට ක්රමයක්

ප්ලාස්මිඩ් වැනි දෛශිකයක් මත ජානමය ද්රව්ය නව නව ධාරක සෛල වෙත මාරු කිරීමේ ක්රියාවලිය පරිවර්තනය කිරීම ලෙස හැඳින්වේ. මෙම තාක්ෂනය මගින් ධාරක සෛල පරිසර හිතකාමී තත්ත්වයකට නිරාවරණය වන පරිදි ඒවාට "නිපුණතා" හෝ තාවකාලිකව පාරදෘශ්ය වේ. විදුලි උපකරණයක් යනු එක් ක්රමයකි. ප්ලාස්මීඩය විශාල වන අතර එය සෛල මගින් ඇති කරන කාර්යක්ෂමතාව අඩු කරයි. වඩා විශාල DNA කොටස් පහසුවෙන් bacteriophage, Retrovirus හෝ වෙනත් වයිරස වාහකයන් හෝ කොස්මමිඩ් යොදා ගෙන ප්රෝටීයනය කිරීමේ ක්රමයක් මගින් ක්ලෝන කරනු ලැබේ. Phage හෝ වෛරස් වාහකයන් බොහෝ විට පුනර්ජනනීය ඖෂධ වලදී භාවිතා කරන නමුත් ඒවාට අවශ්ය නොවන සංකූලතා හා පිළිකා පවා ඇති කරන ඩීඑන්ඒ ඩී.එන්.ඒ.

Transgenic Organisms තෝරාගැනීමේ ක්රම 07

සෑම සෛලයක්ම පරිවර්තනයේ දී ඩී.එන්.ඒ. එසේ කරන අය හඳුනාගැනීම සඳහා ක්රමයක් ඇති බව අත්යවශ්ය වේ. සාමාන්යයෙන් ප්ලාස්මිඩ් ප්රතිජීවක ප්රතිරෝධක සඳහා ජාන රැගෙන යයි. එම ජානවල ප්රකාශනය සහ එම ප්රතිජීවක අඩංගු මාධ්ය මත වර්ධනය වීමට ඇති හැකියාව මත ප්රෙගජන සෛල තෝරා ගත හැකිය. තෝරාගැනීමේ විකල්ප ක්රම අනුගමනය කරනුයේ x-gal / lacZ පද්ධතිය වැනි අනෙකුත් වාර්තා කරන ප්රෝටීනවල හෝ පිළිවෙලින් වර්ණ හා ෆ්ෙලොරසිස්සන් මත පදනම්ව ෙතෝරාගැනීමට ඉඩ සලසයි.